品牌 阿拉丁 貨號(hào) R301899-100ml 規(guī)格 100ml 供貨周期 現(xiàn)貨 主要用途 主要用于從動(dòng)物組織和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥
阿拉丁 R301899-100ml RIPA
阿拉丁 RIPA裂解液（強(qiáng)）-常備現(xiàn)貨
產(chǎn)品貨號(hào)：R301899-100ml
產(chǎn)品名稱：RIPA 裂解液（強(qiáng)）
產(chǎn)品規(guī)格：100ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
規(guī)格或純度：無抑制劑
英文名稱：RIPA Lysis Buffered Solution(Strong)
儲(chǔ)存溫度：2-8°C 儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件：冰袋運(yùn)輸
RIPA 裂解液是一種傳統(tǒng)的組織以及細(xì)胞快速裂解液求索，主要用于從動(dòng)物組織和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白講理論，可用于裂解貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞改進措施。按照其裂解液的強(qiáng)度可以分為強(qiáng)就此掀開、中、弱三類今年，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇相應(yīng)產(chǎn)品穩步前行。RIPA 裂解液( 強(qiáng)) 可以有效提取細(xì)胞核、細(xì)胞膜和胞漿蛋白，提取的蛋白可應(yīng)用于蛋白定量逐步改善、Western Blot 意見征詢、IP 等檢測(cè)分析。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
阿拉丁 RIPA裂解液（強(qiáng)）-常備現(xiàn)貨
使用方法
(一) 貼壁培養(yǎng)細(xì)胞
1. 取本品置于室溫溶解混勻大大提高，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求加入酶抑制劑的必然要求。
2. 去除貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)液，用 PBS 取得了一定進展、NS 或無血清培養(yǎng)液清洗1 次完善好，低速離心，棄上清積極參與，留取沉淀問題分析。
3. 按照 6 孔板每孔加入150 ～250μl 含有酶抑制劑的裂解液的比例，加入本品交流研討。移液器輕輕吹打生產能力，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。置于冰上或 4℃ 裂解示範推廣，通常裂解液作用于細(xì)胞 1 ～3s 內(nèi)堅持好，細(xì)胞就會(huì)被裂解。通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150μl 裂解液已經(jīng)足夠大幅增加，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 ～250μl 特性。
4.10000 ～12000g ，4℃ 離心 5 ～10min( 如無低溫離心機(jī)等特點，室溫下離心亦可) 建言直達，取上清。
5. 后續(xù)的 SDS-PAGE 將進一步、Western 充分發揮、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
( 二) 懸浮培養(yǎng)細(xì)胞
1. 取本品置室溫溶解混勻后成就，加入酶抑制劑重要方式。
2. 低速離心懸浮細(xì)胞，棄上清系統，收集沉淀非常重要。
3. 用手指輕彈細(xì)胞，使其松散空間廣闊。按照 6 孔板每孔細(xì)胞加入150 ～250μl 含有酶抑制劑的裂解液的比例營造一處，加入本品。通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150μl 裂解液已經(jīng)足夠知識和技能，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 ～250μl 取得顯著成效。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞新模式，充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)、胞沉淀不容忽視。
4.10000 ～12000g 組織了，4℃ 離心 5 ～10min( 如無低溫離心機(jī)，室溫下離心亦可) 不要畏懼，取上清。
5. 進(jìn)行后續(xù)的 SDS-PAGE 問題、Western 逐漸顯現、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
( 三) 組織樣本
1. 取本品置于室溫溶解混勻后系統穩定性，加入酶抑制劑長效機製。
2. 把組zhi 剪切成細(xì)小的碎片，越小越好全技術方案。
3. 取在液氮或超低溫冰箱中冷凍 30min 以上的組織分享，迅速用液氮研磨，研磨過程盡量控制在1 ～2min 之內(nèi)信息化，以減少蛋白的降解方式之一。
4. 按照每 20mg 組織加入 150 ～250μl 裂解液的比例，加入含有酶抑制劑的裂解液新型儲能。冰上或4℃ 裂解 15 ～30min 創新能力。
5. 步驟 3 、4 亦可以采用如下過程：按照每 20mg 組織加入 150 ～250μl 裂解液的比例加入含有酶抑制劑的本品範圍。用玻璃勻漿器或組織研磨器勻漿求得平衡，直至充分裂解，該過程盡量控制在 1 ～2min 之內(nèi)空間廣闊，以減少蛋白的降解至關重要。
6.10000 ～12000g ，4℃ 離心 5 ～10min( 如無低溫離心機(jī)服務品質，室溫下離心亦可) 的發生，取上清。
7. 進(jìn)行后續(xù)的 PAGE 影響、Western 狀態、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
注意事項(xiàng)
1. 去除貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)液后指導，如果血清中的蛋白沒有干擾廣泛認同，可以不用清洗。
2. 如果裂解不充分可以適當(dāng)增加裂解液的用量流動性，如果需要高濃度的蛋白樣品鍛造，可以適當(dāng)減少裂解液的用量競爭激烈。
3. 如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50 ～100 萬細(xì)胞/ 離心管改善，然后再裂解空白區。大團(tuán)的細(xì)胞較難裂解充分，而少量的細(xì)胞由于裂解液容易和細(xì)胞充分接觸信息化，相對(duì)比較容易裂解充分形勢。
4. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解平臺建設，通過強(qiáng)烈 Vorte× 使樣品裂解充分服務機製。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便大幅拓展，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分更加堅強。
5. 在低溫情況下有可能出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象與時俱進，可 37℃ 水浴促其溶解，不會(huì)影響使用效果初步建立；溶解時(shí)間不易過長(zhǎng)綜合運用，避免有效成分失效。
6. 裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物的方法，屬正承Ч^好，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組 DNA 等的復(fù)合物持續。在不檢測(cè)和基因組 DNA 結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下等多個領域，可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白產品和服務，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物應用擴展，隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
7. 細(xì)胞裂解的操作步驟增多，應(yīng)置于冰上或 4℃ 進(jìn)行活動上。
使用范圍
適用于一般生物學(xué)及醫(yī)學(xué)研究
產(chǎn)品訂購(gòu)信息：
R301899-100ml RIPA 裂解液（強(qiáng)） 100ml
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