人T细胞核转染试剂盒-土壤RNA提取试剂盒-北京云肽生物科技有限公司

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雙縮脲法蛋白質(zhì)含量測定試劑盒-說明書

更新時間:2025-01-15      瀏覽次數(shù):82

 雙縮脲法蛋白質(zhì)含量測定試劑盒說明書

分光光度法 50T/48S

注意:正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定緊迫性,確保蛋白濃度在 110mg/ml 范圍內(nèi)發展契機。

測定意義:

樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算特征更加明顯。此外示範推廣,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。

測定原理:

強堿性溶液中便利性,雙縮脲與CuSO4 形成紫色絡(luò)合物自主研發;紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān)全過程,故可用來測定蛋白質(zhì)含量集成應用。該方法測定范圍為 1~10mg 蛋白質(zhì)探討,適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣品,尤其是動物材料

自備儀器和用品:

可見分光光度計高效流通、臺式離心機調解製度、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿功能、研缽應用的因素之一、冰和蒸餾水。

組成:

 

產(chǎn)品名稱

DE6001-50T/48S

Storage

試劑一:液體

50ml

4℃

標準品:液體

1ml

4℃

說明書

一份

 

標準品:液體 1ml×1 瓶預期,5 mg/ml敢於監督,4℃保存。

樣品中可溶性蛋白質(zhì)提冉Y構。?/span>

1.        液體樣品:澄清無色液體樣品可以直接測定重要的作用。

2.        組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液(自備規模最大,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水)冰浴勻漿力度,8000g4℃離心 10min系統性,取上清勇探新路,即待測液。(動物樣品常常需要稀釋)

3.        細菌傳遞、真菌:按照細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(ml500~10001 的比例(建議 500 萬細胞加入1ml 提取液)試驗,冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒開展攻關合作,間隔 7 秒切實把製度,總時間 3min);然后 8000g自行開發,4℃進行部署,離心 10min,取上清置于冰上待測應用情況。

測定步驟:

1.     分光光度計預(yù)熱 30 min保護好,調(diào)節(jié)波長到 540 nm,蒸餾水調(diào)零表現。

2.     空白管:取 1 mL 玻璃比色皿特點,加入 200μl 蒸餾水,1000μl 試劑一結論,混勻后室溫靜置 15 min和諧共生,于 540nm 比色,記為 A 空白管適應性強。

3.     標準管:取 1 mL 玻璃比色皿技術交流,加入 200μl 標準液先進的解決方案,1000μl 試劑一,混勻后室溫靜置 15 min創造更多,于 540 nm 比色宣講活動,記為 A 標準管。

4.     測定管:取 1 mL 玻璃比色皿工藝技術,加入 200μl 待測液效率,1000μl 試劑一,混勻后室溫靜置 15 min近年來,于 540nm 比色講道理,記為 A 測定管。

注意:空白管和標準管只需測定一次通過活化。

樣品中蛋白質(zhì)濃度計算公式

C 待測(mg/mL= C 標準管×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)

=5×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)

 

注意事項:

1.  樣品蛋白濃度須在 1~10mg/ml 范圍內(nèi)面向,低于 1mg/ml 不能用此法,高于 10mg/ml 須做相應(yīng)稀釋研學體驗。因此測定前用 1~2 個樣做預(yù)實驗,確保蛋白濃度在 1~10mg/ml 范圍內(nèi)最為突出。

2.  待測樣品蛋白提取可用生理鹽水落實落細、雙蒸水或不含蛋白的 PBS 提取。該法受硫酸銨高效化、Tris 緩沖液干擾製高點項目,提取液中應(yīng)不含這些物質(zhì);否則改用BCA 蛋白質(zhì)含量測定試劑盒範圍和領域。


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